蛋白质鉴定的研究方法
2024-08-14 03:04:17
1、蛋白质鉴定的研究方法:
(1)凯氏定氮法:根据氮在蛋白质分子中含量恒定(平均占16%),因此测定出样品中氮的含量后,即可求出样品中蛋白质含量。
(2)双缩脲法:双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。鉴定反应蛋白质单位1-10mg。
(3)福林-酚试剂法:福林-酚试剂包括两种试剂:碱性铜试剂,磷钼酸及磷钨酸的混合试剂。碱性铜试剂与蛋白质产生双缩脲反应。这种被作用的蛋白质中的酚基(酪氨酸),在碱性条件下易将磷钼酸和磷钨酸还原成蓝色的钼蓝和钨蓝,所生成蓝色的深浅,与蛋白质的含量成正比。在650nm和660nm波长下测定光吸收值,即可测定蛋白质含量。
(4)紫外吸收法:酪氨酸,色氨酸在280nm处左右具有最大吸收。由于在各种蛋白质中这几种氨基酸含量差别不大,所以280nm的吸收值与浓度呈正相关。可用于蛋白质浓度的测定。
2、蛋白质过敏有些人吃了富含蛋白质的食品如鱼、虾、鸡、鸭、蛋、豆制品等会引起过敏,出现各种皮疹,不能吃蛋白粉,鸡蛋,鸭蛋,虾,蟹,等等高蛋白食物。像黄豆,瘦肉,青豆类食物也应该少吃。 容易引起食物过敏的食品主要有八种,它们是花生、牛奶、鸡蛋、面粉、黄豆、果仁、鱼以及水生贝壳类动物食品等,多数为高蛋白食品。牛奶过敏者除了不能饮用牛奶外,还要尽量避免食用乳制品,如奶酪凝乳、酸奶,无乳糖牛奶及奶油蛋糕等。
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